主营产品:
动物实验动物实验外包科研实验外包上海动物实验水迷宫实验外包动物实验外包公司动物造模动物模型构建动物行为学实验细胞实验细胞实验外包细胞培养实验细胞周期实验细胞增殖检测细胞凋亡检测
产品与服务

上海达为科生物科技有限公司

电话:021-55130726

传真:021-55130728

联系人:张艳

电话:18017844061

邮箱:jierdun@jrdbio。com

地址:上海市长江南路180号长江软件园B区B638室  



详细内容

ELISA 实验失败的常见问题

  结合实验中的实际情况,引起 ELISA实验 测定结果与文献报导不一致的原因主要有三点,试剂因素、标本因素和操作因素。

一、试剂因素

1。 试剂应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、操作方便的试剂。

2. 不同厂家的试剂不能混用,包括底物和洗涤液。由于校准标准有差异,还有抗体、检测方法、试剂、交叉反应等因素都会导致对样本的检测结果不一致。如:有的厂家酶标板孔间 CV 值大于 20%,标记酶的活性及显色液的稳定性比较差,使用劣质的试剂必然导致结果的假阳性或假阴性。

3. 要注意试剂的批号和出厂日期,虽然试剂的有效期多为 1 年,建议尽量选择刚出厂的试剂盒。

4. 避免选择假的 ELISA 试剂盒。有些厂家为夸大生产 ELISA 的指标范围,用一种指标来冒充其它指标,造成各种种属、各种指标都可以做的假象。

  比如用 TGF beta 这样的指标代替大多数试剂盒的其它指标作为检测抗体,同样可以获得良好的标准曲线。因为 TGF beta 在大多数哺乳动物中(human, mouse, rat, pig, bovine, etc。)都有广泛表达,种属间的氨基酸序列同源性达 ,TGF beta 随着其他因子的影响,其表达水平也会发生相应的变化,使得实验者难以查觉。

     在分析完可能出现的因素后,分享以下鉴别方法,大家可以直接去丁香园搜索「如何鉴别真假 ELISA 试剂盒」。

(1)利用干扰实验可辨别 ELISA 试剂盒是否检测目的抗原。

(2)如果购买了同一公司的 ELISA 试剂盒 A 和 B,利用交叉实验可辨别 ELISA 试剂盒真伪。

(3)指标本身也可以鉴定试剂盒的真伪。

二、ELISA标本因素和操作因素

      血清是常用的 ELISA 标本,血浆一般可视为与血清同等的标本,标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致,分为内源性物质和外源性物质两种:

1. 内源性物质

      有人认为大约 40% 的人血清标本中含有非特异性干扰物质,可以不同程度影响检测结果。常见的干扰物质有:类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠 Ig (s) 抗体、交叉反应物质和其它物质等。

2. 外源性物质

  外源性物质常常是由于用于 ELISA实验 测定的血标本的采集、贮存等不当所致。如标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存过久、标本凝集不全和采血管中添加物等影响。

三、总结

      当 ELISA 测定结果与预期或文献报导中不一致时,应该考虑试剂因素,这个是做好实验获得正确数据的前提,其次还有标本因素和操作因素等多方面进行分析,并应采取相应措施排除干扰作用,从而为实验提供正确可靠的检测结果。


课题设计、基金申请、实验外包、文章润色服务电话021-55130726,如想了解动物模型的更多内容,欢迎来电咨询,我们将热情为您服务。


Copyright@ 2003-2019  上海达为科生物科技有限公司版权所有      电话:0756-2183150 传真: 地址: 邮编:
              

PK10 PK10 PK10 PK10 PK10 pk10开奖 pk10开奖结果 PK10 PK10 北京赛车平台 北京赛车 秒速赛车度 秒速赛车 秒速时时彩 幸运飞艇 幸运飞艇 幸运飞艇 幸运飞艇 幸运飞艇 幸运飞艇 幸运飞艇 幸运飞艇 重庆时时彩

重庆时时彩 重庆时时彩 重庆时时彩 重庆时时彩 重庆时时彩 PC蛋蛋 PC蛋蛋 PC蛋蛋 PC蛋蛋 PC蛋蛋 PC蛋蛋 PC蛋蛋 PC蛋蛋